NanoBRET™ Target Engagement (TE) Intracellular Kinase Assay System (Promega社)を用いた当社提供のセルベースアッセイサービスでは、リストからご希望のキナーゼターゲットをご選択頂き、生体内に近い条件の下、そのターゲットに対してお客様の化合物がどのように作用するのかを評価し、定量的な結果をお届けいたします。化合物をお送り頂くだけで、インタクトな細胞内で測定された「IC₅₀値」、そしてResidence Time評価結果を得ることが可能です。

インタクトな細胞内で発現された全長キナーゼタンパク質に対する化合物の作用を探る
1タイプの細胞透過性トレーサーで幅広いキナーゼタンパク質ターゲット探索が可能

リストにないターゲットのご相談やサービス詳細につきましてはお問い合わせ下さい。

NanoBRET™ TE Intracellularキナーゼアッセイサービス内容

● IC₅₀値算出試験&Residence Time解析

IC₅₀値算出試験
(Half-log希釈 8濃度測定)

Residence Time 解析
(IC₅₀値算出試験の結果をベースに濃度を決定しn=2で試験を行います)

● パネルアッセイサービス

CDK パネルアッセイサービス

24のCDKターゲットから構成されるアッセイパネルを用いてお客様の化合物の特異性を評価

Kinome-Wide Profilingサービス
（192キナーゼパネル）

HEK293にそれぞれ発現された192の全長キナーゼに対して1タイプのトレーサーを用いて一括評価を行ことにより、細胞環境下のアッセイでしか見えてこない化合物の特性を明らかにします

細胞内環境での測定でより生体内に近い反応を予測する

Target occupancy with 1μM Crizotinib

(Right)using intracellular kinases in HEK293

(Left)using recombinant kinases assayed biochemically
at Km ATP on Carna's MSA

Biochemical Assay [ATP=Km] NanoBRET Assay

NanoBRET™ System

ドナーであるNanoLuc® luciferase融合タンパク質からアクセプターとなる蛍光標識プローブ、NanoBRET™ トレーサーへのエネルギー移転をベースとした生細胞内での分子間相互作用を検出するアッセイです。生細胞内で発現されたNanoLuc® luciferase融合タンパク質に対し、NanoBRET™トレーサーと競合的に置換された化合物が可逆的に結合することにより、化合物の見かけの親和性が測定できます。

標的タンパク質(NanoLuc® luciferase融合タンパク質)を発現させた細胞にBRET acceptorとなる蛍光標識した膜透過性tracerを添加する。
Tracerが標的分子に結合するとBRETが起こり、acceptorが発光する。

化合物を添加することによる、BRETシグナルの変化にて結合阻害を検出。

IC₅₀ 値算出試験

Half log希釈系列にて８濃度に展開された測定値からHEK293内に全長で発現されたターゲットに対する化合物のIC₅₀値を算出致します。実験反復回数はご希望に合わせてn=1、n=2、n=3からご指定頂けます。

試験結果は試験開始から2週間でお届け致します。

＜ご利用ガイド＞

サービスの流れ

被験物質取り扱いについて

NanoBRET™ セルベースアッセイ申込書