NanoBRET™ TE细胞内激酶测定服务
定量激酶抑制剂在细胞环境中的占有率、选择性和亲和力（自然发生结合）对于更准确地预测其对人激酶的结合能力至关重要。除平衡性评价外，还需要获得诸如滞留时间（Residence Time）在内的动力学参数，以实现更好的化合物优化。
使用NanoBRET™靶点结合细胞内激酶检测系统（Promega）的定量和广谱激酶谱分析服务，使您能够评估您的化合物在生理条件下与选定细胞内靶点的结合。该平台在保持细胞完整的同时，还能够测定化合物在靶点上的滞留时间。请提交您感兴趣的化合物，Carna将第一时间为您提供细胞IC50值计算和滞留时间分析服务！
研究化合物在全长表达激酶的完整细胞中的功能
一类示踪剂即可涵盖广泛的激酶研究
如有任何问题和/或若要了解更多信息，请及时联系我们或您的区域经销商。
服务
● IC50 测定和滞留时间分析
● 激酶Panel谱测定服务
- CDK Panel谱测定服务
- 使用由24种CDK靶点组成的CDK激酶组合，探索CDK抑制剂的选择性。
- 广泛激酶(Kinome-Wide)谱分析服务
（192个激酶靶点，K192） - 共同识别化合物的特性。我们将使用相同的示踪剂，在统一的试验条件下，针对在HEK293细胞中单独表达的192种全长激酶，对您的化合物进行评估。
在细胞环境下提高选择性
- 1 μM克唑替尼的靶点占有率
- （右）在HEK293中使用细胞内激酶
- （左）在Carna的MSA上使用重组激酶进行生化检测
（ATP＝Km）
Biochemical Assay [ATP=Km]
NanoBRET Assay
NanoBRET™ 系统
此系统采用接近性检测方法，通过测量从生物发光蛋白供体（NanoLuc®荧光素酶）到荧光探针（NanoBRET™示踪剂）的能量转移，来检测活细胞中的分子相互作用。NanoBRET™TE试验通过竞争性置换与活细胞中表达的NanoLuc®荧光素酶-激酶融合蛋白可逆性结合的NanoBRET™示踪剂，测定供试化合物的表观亲和力。
向全长表达激酶/NanoLuc®融合蛋白的HEK293细胞中加入细胞渗透性荧光NanoBRET™示踪剂（BRET受体）。示踪剂与靶蛋白结合产生BRET信号
供试化合物与靶蛋白的结合导致靶蛋白与示踪剂之间的BRET信号在完整细胞中丢失
相关文献
IC50测定服务
通过半对数稀释法，使用8种浓度的化合物（单样、双样或三样）在生理条件下进行IC50测定。
2周后出具结果报告。
- <客户服务指南>
- 服务流程
- 化合物处理和运输
- NanoBRET™ Cell-based Assay申请表
