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PhosphoSens™ キナーゼアッセイサポート

PhosphoSens™(AssayQuant Technologies社)技術を用いたキナーゼアッセイでは、酵素反応をリアルタイムかつ経時的に測定することで動的なキネティックデータの取得が可能です。Mg2+をキレーティングすることで蛍光を発するSulfonamido-Oxine(Sox) を組み込んだペプチド基質はキナーゼによるリン酸化で蛍光を発します。このリン酸化による発光を蛍光強度の増加として経時的に検出したデータは反応メカニズムの理解を深め酵素特性の評価および阻害剤効果の詳細解析に役立ちます。シンプルなプロトコールでスループットが高く薬剤スクリーニングにも最適なプラットフォームです。

お客様のラボでPhosphoSens™キナーゼアッセイを用いて薬剤評価やスクリーニングを行う際のご参考用に、カルナでは自社タンパク質製品を用いて最適化したPhosphoSens™キナーゼアッセイ実施条件を公開しております。

本ページリストにあるアッセイは全てカルナのキナーゼ製品を用いて最適化されています。各アッセイの詳細条件は添付されているPDFデータ内の記載をご覧ください。リスト上のキナーゼタンパク質製品は全て当社で購入可能です。

お問い合わせ、ご質問、ご相談等はこちらよりまたはinfo@carnabio.com からご連絡ください。

PhosphoSens™キナーゼアッセイ 反応条件一覧表

Kinase Name Protein Kinase PhosphoSens Substrate Sample
Activity
Data
Tag Carna Product Name Cat. No. AssayQuant Cat. No. Conc.(uM) Manufacturer
ABL(ABL1) HIS ABL(ABL1) 08-001 AQT0032 10 µM AssayQuant Technologies
ABL(ABL1)[E255K] HIS ABL(ABL1)[E255K] 08-094 AQT0032 15 µM AssayQuant Technologies
ABL(ABL1)[T315I] HIS ABL(ABL1)[T315I] 08-093 AQT0032 15 µM AssayQuant Technologies
AKT1 GST AKT1 01-101 AQT0536 15 µM AssayQuant Technologies
AKT2 GST AKT2 01-102 AQT0536 15 µM AssayQuant Technologies
AKT3 GST AKT3 01-103 AQT0536 15 µM AssayQuant Technologies
ALK GST ALK 08-518 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
ALK[D1203N] GST ALK[D1203N] 08-583 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
ALK[G1202R] GST ALK[G1202R] 08-544 AQT0101 15 µM AssayQuant Technologies
ALK[I1171N] GST ALK[I1171N] 08-566 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
ALK[I1171S] GST ALK[I1171S] 08-569 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
ALK[I1171T] GST ALK[I1171T] 08-590 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
ALK[L1196M/G1202R] GST ALK[L1196M/G1202R] 08-556 AQT0101 10 µM AssayQuant Technologies
ALK[L1198F] GST ALK[L1198F] 08-571 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
ALK[V1180L] GST ALK[V1180L] 08-570 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
ARG(ABL2) GST ARG(ABL2) 08-102 AQT0032 10 µM AssayQuant Technologies
AurA GST AurA (AURKA) 05-101 AQT0186 15 µM AssayQuant Technologies
AurB(AURKB)/INCENP GST AurB(AURKB)/INCENP 05-102 AQT0186 15 µM AssayQuant Technologies
AurC GST AurC (AURKC) 05-103 AQT0186 15 µM AssayQuant Technologies
AXL GST AXL 08-107 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
BLK GST BLK 08-164 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
BMX GST BMX 08-179 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
BRK(PTK6) GST BRK(PTK6) 08-165 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
BRSK1 GST BRSK1 02-115 AQT0900 15 µM AssayQuant Technologies
BRSK2 GST BRSK2 02-116 AQT0900 15 µM AssayQuant Technologies
BTK GST BTK 08-180 AQT0101 15 µM AssayQuant Technologies
BUB1/BUB3 GST BUB1/BUB3 05-187 AQT0345 15 µM AssayQuant Technologies
BUBR1 GST BUBR1 (BUB1B) 05-105 AQT0683 15 µM AssayQuant Technologies
CaMK2α(CAMK2A) GST CaMK2α(CAMK2A) 02-109 AQT0356 15 µM AssayQuant Technologies
CAMKK2 GST CAMKK2 05-108 AQT1116 15 µM AssayQuant Technologies
CDK1(CDC2)/CycA2 GST CDK1(CDC2)/CycA2 04-119 AQT0297 15 µM AssayQuant Technologies
CDK1(CDC2)/CycB1 GST CDK1(CDC2)/CycB1 04-102 AQT0297 15 µM AssayQuant Technologies
CDK12(CRKRS)(720-1490aa)/CycK BTN BTN-CDK12(CRKRS)(720-1490aa)/CycK 04-413-20N AQT0991 15 µM AssayQuant Technologies
CDK2/CycA2 GST CDK2/CycA2 04-103 AQT0297 15 µM AssayQuant Technologies
CDK2/CycE1 GST CDK2/CycE1 04-165 AQT0297 15 µM AssayQuant Technologies
CDK3/CycE1 GST CDK3/CycE1 04-104 AQT0297 15 µM AssayQuant Technologies
CDK4/CycD3 GST CDK4/CycD3 04-105 AQT0258 15 µM AssayQuant Technologies
CDK6/CycD1 GST CDK6/CycD1 04-114 AQT0258 15 µM AssayQuant Technologies
CDK6/CycD3 GST CDK6/CycD3 04-107 AQT0258 15 µM AssayQuant Technologies
CDK7/CycH/MAT1 GST CDK7/CycH/MAT1 04-108 AQT0733 15 µM AssayQuant Technologies
CDK9/CycK GST CDK9/CycK 04-111 AQT1007 15 µM AssayQuant Technologies
CDK9/CycT1 GST CDK9/CycT1 04-110 AQT0733 15 µM AssayQuant Technologies
CDK9/CycT2 GST CDK9/CycT2 04-121 AQT0733 15 µM AssayQuant Technologies
CHK1(CHEK1) GST CHK1(CHEK1) 02-117 AQT0694 15 µM AssayQuant Technologies
CHK2(CHEK2) GST CHK2(CHEK2) 02-162 AQT0694 15 µM AssayQuant Technologies
CK1α GST CK1α (CSNK1A1) 03-101 AQT0709 15 µM AssayQuant Technologies
CK1γ1 GST CK1γ1 (CSNK1G1) 03-105 AQT0709 15 µM AssayQuant Technologies
CK1γ2 GST CK1γ2 (CSNK1G2) 03-106 AQT0709 15 µM AssayQuant Technologies
CK1γ3 GST CK1γ3 (CSNK1G3) 03-107 AQT0709 15 µM AssayQuant Technologies
CK1δ GST CK1δ (CSNK1D) 03-103 AQT0709 15 µM AssayQuant Technologies
CK1ε GST CK1ε (CSNK1E) 03-104 AQT0709 15 µM AssayQuant Technologies
COT Tag-free COT (MAP3K8) 07-301 AQT0918 15 µM AssayQuant Technologies
CRIK GST CRIK (CIT) 01-104 AQT0537 15 µM AssayQuant Technologies
CSK GST CSK 08-111 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
DDR1(SRC treated) GST DDR1(SRC treated) 08-132 AQT0280 15 µM AssayQuant Technologies
DDR2 GST DDR2 08-114 AQT0235 15 µM AssayQuant Technologies
DYRK1A GST DYRK1A 04-130 AQT0260 20 µM AssayQuant Technologies
DYRK1B GST DYRK1B 04-131 AQT0260 20 µM AssayQuant Technologies
EPHA1 GST EPHA1 08-119 AQT0658 15 µM AssayQuant Technologies
EPHA2 GST EPHA2 08-121 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
EPHA3 GST EPHA3 08-122 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
EPHA4 GST EPHA4 08-123 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
EPHA5 GST EPHA5 08-124 AQT0658 15 µM AssayQuant Technologies
EPHA6 GST EPHA6 08-125 AQT0653 15 µM AssayQuant Technologies
EPHA7 GST EPHA7 08-126 AQT0653 15 µM AssayQuant Technologies
EPHA8 GST EPHA8 08-127 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
EPHB1 GST EPHB1 08-128 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
EPHB2 GST EPHB2 08-129 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
EPHB3 GST EPHB3 08-130 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
EPHB4 GST EPHB4 08-131 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
Erk1(MAPK3) GST Erk1(MAPK3) 04-142 AQT0490 10 µM AssayQuant Technologies
Erk2(MAPK1) GST Erk2(MAPK1) 04-143 AQT0490 10 µM AssayQuant Technologies
FER GST FER 08-139 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
FES GST FES 08-140 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
FGFR1 GST FGFR1 08-133 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
FGFR2 GST FGFR2 08-134 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
FGFR3 GST FGFR3 08-135 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
FGFR3[V555M] GST FGFR3[V555M] 08-543 AQT0515 15 µM AssayQuant Technologies
FGFR4 GST FGFR4 08-136 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
FGR GST FGR 08-166 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
FLT1 GST FLT1 08-189 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
FLT3 GST FLT3 08-154 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
FLT4 GST FLT4 08-190 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
FMS(CSF1R) GST FMS(CSF1R) 08-155 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
FRK GST FRK 08-167 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
FYN [isoform a] GST FYN [isoform a] 08-168 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
FYN [isoform b] GST FYN [isoform b] 08-531 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
HCK GST HCK 08-169 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
HER4 GST HER4 (ERBB4) 08-118 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
HGK GST HGK (MAP4K4) 07-137 AQT0135 15 µM AssayQuant Technologies
IGF1R GST IGF1R 08-141 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
IKKα(CHUK) GST IKKα(CHUK) 05-112 AQT0683 15 µM AssayQuant Technologies
INSR GST INSR 08-142 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
IRR GST IRR (INSRR) 08-143 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
ITK GST ITK 08-181 AQT0101 15 µM AssayQuant Technologies
JAK2 HIS JAK2 08-045 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
JAK2(JH1 JH2) GST JAK2(JH1 JH2) 08-514 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
JAK3 HIS JAK3 08-046 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
KDR GST KDR 08-191 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
KIT GST KIT 08-156 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
KIT[D816V] GST KIT[D816V] 08-505 AQT0101 15 µM AssayQuant Technologies
LATS1/MOBKL1A GST LATS1/MOBKL1A 01-523 AQT0476 15 µM AssayQuant Technologies
LATS2/MOBKL1A GST LATS2/MOBKL1A 01-524 AQT0476 15 µM AssayQuant Technologies
LCK GST LCK 08-170 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
LTK GST LTK 08-106 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
LYNa GST LYNa 08-171 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
LYNb GST LYNb 08-172 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
MAP3K1 GST MAP3K1 07-103 AQT0623 15 µM AssayQuant Technologies
MAP3K14 GST MAP3K14 07-102 AQT0912 15 µM AssayQuant Technologies
MAPKAPK2 GST MAPKAPK2 02-142 AQT0426 15 µM AssayQuant Technologies
MAPKAPK3 GST MAPKAPK3 02-143 AQT0425 15 µM AssayQuant Technologies
MAPKAPK5 GST MAPKAPK5 02-144 AQT0426 15 µM AssayQuant Technologies
MAPKAPK5 GST MAPKAPK5 02-144 AQT1102 15 µM AssayQuant Technologies
MER(MERTK) GST MER(MERTK) 08-108 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
MET GST MET 08-151 AQT0658 15 µM AssayQuant Technologies
MET[D1228N] GST MET[D1228N] 08-120 AQT0702 15 µM AssayQuant Technologies
MET[Y1230H] GST MET[Y1230H] 08-178 AQT0658 15 µM AssayQuant Technologies
MLK2(MAP3K10) GST MLK2(MAP3K10) 09-116 AQT0646 15 µM AssayQuant Technologies
MLK3(MAP3K11) GST MLK3(MAP3K11) 09-117 AQT0646 15 µM AssayQuant Technologies
MNK1(MKNK1) GST MNK1(MKNK1) 02-145 AQT0414 15 µM AssayQuant Technologies
MNK2 GST MNK2 (MKNK2) 02-146 AQT0701 15 µM AssayQuant Technologies
MRCKβ GST MRCKβ (CDC42BPB) 01-108 AQT0837 15 µM AssayQuant Technologies
MSK1 GST MSK1 (RPS6KA5) 01-147 AQT0797 10 µM AssayQuant Technologies
MSK2 GST MSK2 (RPS6KA4) 01-148 AQT0988 15 µM AssayQuant Technologies
MTOR(FRAP)/MLST8 DYKDDDDK MTOR(FRAP)/MLST8 11-431 AQT0732 20 µM AssayQuant Technologies
MUSK GST MUSK 08-153 AQT0031 15 µM AssayQuant Technologies
NEK3 GST NEK3 05-127 AQT0685 15 µM AssayQuant Technologies
NEK6 GST NEK6 05-130 AQT0688 15 µM AssayQuant Technologies
NEK7 GST NEK7 05-131 AQT0887 15 µM AssayQuant Technologies
p38α(MAPK14) GST p38α(MAPK14) 04-152 AQT0490 10 µM AssayQuant Technologies
p38β GST p38β (MAPK11) 04-153 AQT0490 10 µM AssayQuant Technologies
p38γ GST p38γ (MAPK12) 04-155 AQT0652 10 µM AssayQuant Technologies
p38δ GST p38δ (MAPK13) 04-154 AQT0652 10 µM AssayQuant Technologies
PASK GST PASK 02-128 AQT0694 15 µM AssayQuant Technologies
PCTAIRE1(CDK16)/CycY GST PCTAIRE1(CDK16)/CycY 04-116 AQT0258 15 µM AssayQuant Technologies
PDGFRα(PDGFRA) GST PDGFRα(PDGFRA) 08-157 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
PDGFRα(PDGFRA)[V561D] GST PDGFRα(PDGFRA)[V561D] 08-507 AQT0734 15 µM AssayQuant Technologies
PDGFRβ(PDGFRB) GST PDGFRβ(PDGFRB) 08-158 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
PIM1 HIS PIM1 02-054 AQT0474 15 µM AssayQuant Technologies
PIM2 GST PIM2 02-155 AQT0474 15 µM AssayQuant Technologies
PIM3 GST PIM3 02-156 AQT0474 15 µM AssayQuant Technologies
PKACα(PRKACA) GST PKACα(PRKACA) 01-127 AQT0458 15 µM AssayQuant Technologies
PKACβ(PRKACB) GST PKACβ(PRKACB) 01-128 AQT0458 15 µM AssayQuant Technologies
PKD1 GST PKD1 (PRKD1) 02-157 AQT0803 15 µM AssayQuant Technologies
PKD2 GST PKD2 (PRKD2) 02-158 AQT0803 15 µM AssayQuant Technologies
PKD3 GST PKD3 (PRKD3) 02-159 AQT0803 15 µM AssayQuant Technologies
PRKX GST PRKX 01-130 AQT0186 15 µM AssayQuant Technologies
PYK2(PTK2B) GST PYK2(PTK2B) 08-138 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
RET GST RET 08-159 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
RET[G810C/M918T] GST RET[G810C/M918T] 08-580 AQT0101 15 µM AssayQuant Technologies
RET[V804M] BTN BTN-RET[V804M] * 08-460-20N AQT0101 15 µM AssayQuant Technologies
ROCK1 GST ROCK1 01-109 AQT0839 15 µM AssayQuant Technologies
ROCK2 GST ROCK2 01-110 AQT0839 15 µM AssayQuant Technologies
RON GST RON (MST1R) 08-152 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
ROS(ROS1) GST ROS(ROS1) 08-163 AQT0661 15 µM AssayQuant Technologies
ROS(ROS1)[G2032R/L2086F] GST ROS(ROS1)[G2032R/L2086F] 08-587 AQT0101 15 µM AssayQuant Technologies
RSK1(RPS6KA1) GST RSK1(RPS6KA1) 01-149 AQT0232 15 µM AssayQuant Technologies
RSK2(RPS6KA3) GST RSK2(RPS6KA3) 01-150 AQT0232 15 µM AssayQuant Technologies
RSK3(RPS6KA2) GST RSK3(RPS6KA2) 01-151 AQT0232 15 µM AssayQuant Technologies
RSK4(RPS6KA6) GST RSK4(RPS6KA6) 01-152 AQT0232 15 µM AssayQuant Technologies
SGK GST SGK 01-158 AQT0536 15 µM AssayQuant Technologies
SGK2 GST SGK2 01-159 AQT0536 15 µM AssayQuant Technologies
SGK3 GST SGK3 (SGKL) 01-160 AQT0536 15 µM AssayQuant Technologies
SRC GST SRC 08-173 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
SRM GST SRM (SRMS) 08-174 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
SYK GST SYK 08-176 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
TAK1-TAB1(MAP3K7) BTN BTN-TAK1-TAB1(MAP3K7) * 09-419-21C AQT0356 15 µM AssayQuant Technologies
TAOK2 GST TAOK2 07-133 AQT0253 15 µM AssayQuant Technologies
TBK1 GST TBK1 05-115 AQT0897 15 µM AssayQuant Technologies
TEC GST TEC 08-182 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
TIE2(TEK) GST TIE2(TEK) 08-185 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
TLK1 GST TLK1 05-166 AQT0686 15 µM AssayQuant Technologies
TLK2 GST TLK2 05-167 AQT0686 15 µM AssayQuant Technologies
TNIK GST TNIK 07-138 AQT0135 15 µM AssayQuant Technologies
TRKA(NTRK1) GST TRKA(NTRK1) 08-186 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
TRKB(NTRK2) GST TRKB(NTRK2) 08-187 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
TRKC(NTRK3) GST TRKC(NTRK3) 08-197 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
TTBK2 GST TTBK2 03-109 AQT0686 15 µM AssayQuant Technologies
TTK GST TTK 05-169 AQT0897 15 µM AssayQuant Technologies
TXK GST TXK 08-183 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
TYK2 GST TYK2 08-147 AQT0663 20 µM AssayQuant Technologies
TYRO3 GST TYRO3 08-109 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
ULK3 GST ULK3 05-173 AQT0686 15 µM AssayQuant Technologies
WEE1 BTN BTN-WEE1 05-477-20N AQT0728 40 µM AssayQuant Technologies
YES(YES1) GST YES(YES1) 08-175 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies
ZAK GST ZAK 09-120 AQT0753 15 µM AssayQuant Technologies
ZAP70 GST ZAP70 08-177 AQT0794 15 µM AssayQuant Technologies

PhosphoSens™アッセイ原理&アッセイフォーマット

PhosphoSens™ ではSoxをシステイン残基に導入した改良型CSoxセンサーを使用。CSoxを結合させた基質がキナーゼ、ATP、Mg2+の存在下でリン酸化されるとMg2+がリン酸基とCSoxにキレーティングされることにより複合体が形成され、ここに励起光を照射することで蛍光を発する。この蛍光強度の変化を経時的に検出することで、基質のリン酸化状態の変化をリアルタイムでモニターすることが出来る。
(本技術はマサチューセッツ工科大学(MIT)にて開発、MITが保持する特許を独占的にAssayQuant社が実施)
PhosphoSens‑Kineticフォーマット(連続蛍光強度測定)
精製されたキナーゼ酵素やその他サンプル(例:細胞溶解液、組織ホモジネート)を用いて、IC₅₀、作用機序(MOA/MOI)、構造活性相関(SAR)研究に必要なリアルタイムでのキネティックス測定が可能です。
PhosphoSens‑Red(時間分解蛍光、エンドポイント測定)
ハイスループットスクリーニング(HTS)に最適なTRF(時間分解蛍光)ベースのフォーマットで、化合物の自己蛍光を最小限に抑えつつ、PhosphoSens技術を最大限に活かした測定が可能です。
PhosphoSens™技術を用いたキット製品の購入、アッセイ試験の外部委託をご検討されている方へ
AssayQuant Technologies社提供 アッセイキット製品・サービスについては下のリンクより各専用サイトで詳細情報をご覧頂けます。ご購入・ご利用等のご相談につきましてはお問い合わせください。
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